提的细菌DNA总是3条带是怎么回事我提的是细菌的全基因组DNA,电泳检测时,总是出现3条带。方法如下,取1.5ml 细菌液体培养物于灭菌EP管中,12000rpm,离心1min,弃去上清液,收集菌体,如果

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 04:57:07
提的细菌DNA总是3条带是怎么回事我提的是细菌的全基因组DNA,电泳检测时,总是出现3条带。方法如下,取1.5ml 细菌液体培养物于灭菌EP管中,12000rpm,离心1min,弃去上清液,收集菌体,如果

提的细菌DNA总是3条带是怎么回事我提的是细菌的全基因组DNA,电泳检测时,总是出现3条带。方法如下,取1.5ml 细菌液体培养物于灭菌EP管中,12000rpm,离心1min,弃去上清液,收集菌体,如果
提的细菌DNA总是3条带是怎么回事
我提的是细菌的全基因组DNA,电泳检测时,总是出现3条带。方法如下,
取1.5ml 细菌液体培养物于灭菌EP管中,12000rpm,离心1min,弃去上清液,收集菌体,如果菌体较少可再重复此操作。
2. 加400ul 裂解液(40mM Tris-醋酸,pH7.20mM 醋酸钠,1mM EDTA,1%SDS)。用微量吸管快速吹打,使其混匀。
3. 加200ul 5M NaCl,混匀后,12000rpm,此步骤可重复2次去糖。
4. 将上清液移至另一灭菌EP管中,加入等体积的苯酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),温和颠倒混合,12000rpm,离心3min,转移上清液,重复抽提。
5. 加入2倍体积的无水乙醇或异丙醇,沉淀DNA,用70%乙醇洗沉淀块2-3次,室温静止晾干。加入50ul TE缓冲液重新悬浮DNA,于-4℃下保存备用。

提的细菌DNA总是3条带是怎么回事我提的是细菌的全基因组DNA,电泳检测时,总是出现3条带。方法如下,取1.5ml 细菌液体培养物于灭菌EP管中,12000rpm,离心1min,弃去上清液,收集菌体,如果
细菌DNA总是3条带?考虑其中含有的质粒吧.
一般提取质粒DNA会出现三条带.
告诉你的提取方法 我帮你判断一下

分析原因:
1.如果提的是基因组,那么极有可能是基因组被打断了,提的时候要一定轻柔,这点超级注意,像对女孩子一样。
2.如果提的是质粒,那么它本身就是3条带,因为有3种形式的,超螺旋,线性和开环。
3.最后一种可能是提出来的东西很混乱。...

全部展开

分析原因:
1.如果提的是基因组,那么极有可能是基因组被打断了,提的时候要一定轻柔,这点超级注意,像对女孩子一样。
2.如果提的是质粒,那么它本身就是3条带,因为有3种形式的,超螺旋,线性和开环。
3.最后一种可能是提出来的东西很混乱。

收起

说明你提出的DNA不纯,存在三种DNA的空间状态。
琼脂糖电泳进行鉴定质粒DNA时,多数情况下你能看到三条带,但千万不要认为你看到的是超螺旋、线性和开环这三条带。
碱法抽提得到质粒样品中不含线性DNA,不信的话你用EcoRI来线性化质粒后再进行琼脂糖电泳,就会看到线性质粒DNA的位置与这三条带的位置不一样。
其实这三条带以电泳速度的快慢而排序,分别是超螺旋、开环和复制中间体...

全部展开

说明你提出的DNA不纯,存在三种DNA的空间状态。
琼脂糖电泳进行鉴定质粒DNA时,多数情况下你能看到三条带,但千万不要认为你看到的是超螺旋、线性和开环这三条带。
碱法抽提得到质粒样品中不含线性DNA,不信的话你用EcoRI来线性化质粒后再进行琼脂糖电泳,就会看到线性质粒DNA的位置与这三条带的位置不一样。
其实这三条带以电泳速度的快慢而排序,分别是超螺旋、开环和复制中间体(即没有复制完全的两个质粒连在了一起)。
如果你不小心在溶液II加入后过度振荡,会有第四条带,这条带泳动得较慢,远离这三条带,是20-100kb的大肠杆菌基因组DNA的片断。

收起

提的细菌DNA总是3条带是怎么回事我提的是细菌的全基因组DNA,电泳检测时,总是出现3条带。方法如下,取1.5ml 细菌液体培养物于灭菌EP管中,12000rpm,离心1min,弃去上清液,收集菌体,如果 我跑的细菌总DNA 无条带,是DNA降解了么? PCR后进行DNA电泳跑的条带是一条,但不是我想要的条带,是怎么回事啊? 提取细菌DNA检测到有条带,PCR后无条带;而基因组DNA检测到无条带的,PCR后却有条带.怎么解释? 土壤细菌DNA 小弟我提土壤总DNA准备PCR细菌中一种酶的基因,可以半个月过去了,一直P不出来条带,我自己感觉模板存在问题的可能性最大,请有经验的大侠们指点一下,土壤提细菌总DNA量一般多少 跑出的细菌总DNA 的条带是弥散的,marker跑的也不清楚, 植物基因组DNA,PCR没有条带这是我提的植物基因组DNA ,PCR没有条带,帮我看看基因组提的有没有问题,怎么才PCR能出来呢 土壤细菌总DNA pcr模板量一般多少?小弟新手,最近提取土壤细菌总DNA,pcr一直P不出条带,我感觉多数是模板的问题,请各位大侠们指点一下,一般模板量是多少? 提了DNA之后电泳看不到条带,用CTAB法提取植物DNA,用70%乙醇清洗时能看到提出的白色的DNA,之后我加双蒸水37℃水浴50min使DNA溶解.然后取5微升电泳40min,结果看不到条带.是水浴时间太长让DNA降解 提取DNA后怎样判断是否成功是不是作琼脂糖凝胶电泳就可以了呢,有条带就行了?那怎样分辨动物组织DNA和细菌DNA?我提取得是昆虫肠道细菌DNA,把肠道研磨提取,然后要肠道细菌的,有积分赠送. 细菌DNA的作用 细菌基因组DNA 的PCR扩增问题我提取了革兰氏阴性菌的基因组DNA并用几种不同的引物对其进行PCR扩增,意在扩增一段特定的基因片段,其中一对引物扩增出了两条带,一条500bp左右,为目的条带,另 质粒DNA 的电泳图谱为何有时只有一条带谱,有时又有2-3条带谱? rna提取的OD260/280是2.0左右,但总是跑不出条带,下面要做rt-pcr,怎么改进啊,用天泽的盒子提取的rna,测得OD260/280=2.06,浓度65ng/ul 提了好几次都是2.0左右,但一直跑不出rna条带,倒是有dna带,下面要做rt- 质粒DNA的提取:电泳图.帮我分析一下.我组是最亮的两条带 我已经分离到一种高纯度的病毒DNA,将它再进行蔗糖密度梯度超速离心后得到了四条带,这是怎么回事啊?我本以为该病毒DNA已经纯度很高了,经过离心后本以为是一条带,结果出现四条来,都比较 这是我提的家蚕表皮基因组DNA跑的电泳图片,这是怎么回事? PCR产物电泳鉴定时Marker条带竟然没有.我前两天跑电泳的时候,PCR产物倒是能看到条带,就是marker条带没有了,不晓得是怎么回事?以前跑电泳时,Marker条带都很清晰的.