PCR退火温度态度会导致扩增不出目的条带么?

PCR退火温度态度会导致扩增不出目的条带么? PCR不能扩增出目的条带,用的是文献中提供的引物总是扩增不出来,目的片段279bp,我用的条件是94℃,5min；94℃,30s,50℃,30s,72℃,45s,30个循环；72℃,5min.其中退火温度有试过56℃,58℃,都不行,只有引 请问若因为非特异扩增导致PCR产物弥散,理论上弥散带里是否应该包含目的条带?谢谢TT-TTPCR产物电泳弥散,因为退火温度为55,所以初步考虑是退火过低导致的非特异扩增.但小女子有一疑问,我的 上下游引物退火温度分别为47、49℃,如何设置温度梯度PCR最合适引物退火温度低（上下游分别为47、49）,P不出目的条带 随机pcr目的片段10000以上,延伸时间多少比较合适?普通taq,延伸能力是不是不太理想?另外退火温度较高,64度,也是不出条带的原因吗? 基因的PCR扩增实验扩增不出DNA条带是什么原因? [求助] PCR产物条带很淡最近做的PCR一直条带很淡,已经调了一些条件,还是没有效果. 目前是这样的：目的片段大约2.5kb,退火温度55度,从电泳的结果看来目的条带很整齐,也没有非特异性扩增, PCR扩增不出来条带的原因? 目的条带比较短 pcr条件怎么调整梯度退火温度，Mg2+浓度都有试过改变，还是不行，带不清晰，而且弥散 pcr退火温度太高有什么缺点pcr的引物如果很长,导致tm值很高,这样扩增的退火温度就会很高,如达到65-70℃,会不会导致模板正反链的复性,从而导致扩增效率降低? PCR扩增1829BP的片段,一对引物的Tm都是64度,退火温度已经试过55和50度都没有目的条带,请教pcr设置参数在55和50度只看到引物二聚体且有拖尾现象,没有目的条带 PCR基因扩增问题退火温度根据什么判断? 做RT-PCR时,上下引物退火温度一定要一样吗?内参条带很亮,为什么没有目的基因? 一个引物PCR扩增出的多个条带为什么亮度会不同?用ISSR标记分析遗传多样性,一个引物的PCR扩增结果可以有多个条带,为什么有的条带很亮,有的条带就不太亮? 检测血清的病毒为阴性,PCR确能扩增出目的条带,测序结果也对,是怎么回事? 基因组DNA扩增PCR时为什么会出现两个条带 pcr扩增时出现多条带,目的条带很亮,多余的带比目的条带大,是怎么回事 请问荧光定量PCR进行相对定量时,若是目的基因和内参基因扩增效率不一致,为什么会导致结果的不准确?那么怎么平衡扩增效率呢?