DNA目的片段的回收方法?生物科技方面的信息可以到什么地方了解

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/02 14:36:14
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楼主可以去生物帮啊,依托互联网,在注重科学性、实用性和权威性的前提下,提供最新、领先、精准、高效、全面的生物产品和技术信息.回收目的片段的方法很多,常用的有冻融法,低熔点琼脂糖法,透析代法、电泳回收法、玻璃孔回收法等.本实验采用电泳回收法.通过特别的 V 形电泳槽,将挖出的含有目的片段的凝胶置于 V 形槽前,接通电泳电源,DNA 即进入 V 形管中,回收 V 形管中溶液即可,V 形管较小,回收的 DNA 片段能保持较高的浓度.实验步骤 1.大量酶切产物的电泳分离:琼脂糖为 0.8 %,选用大型电泳槽及厚梳子,并载低电压下电泳以提高分辨率.2.紫外灯下用刀片小心切出含 1000bpDNA 片段的凝胶.3.把凝胶片置于特制的 V 型槽平台上,在 V 型槽中加入 0.5 × TBE 电泳缓冲液(使其刚好淹过胶面),再在 V 型孔中加入 7MNH 4 Ac ,接通电源进行电泳.4.紫外灯下检测凝胶块是否含有 DNA ,判断 DNA 是否全部进入 V 形管溶液中.参考:please click to connect www.bio1000.com/zt/dna/164670.html .can help you 5.当 DNA 进入 V 形管中,放掉电泳槽中的缓冲液,吸出 V 形管中的溶液.6.溶液加两倍体积的无水酒精,混匀,置- 70 ℃ 两小时或者- 20 ℃ 过夜.7.1200rpm 离心 10 分钟,沉淀用 70 %酒精洗一次,风干,加入 10ul 与 8ul TE 及 1ul 载样缓冲液混合,电泳检查并根据带的亮度估算其浓度.注意事项 挖含目的 DNA 的凝胶时,尽量减少周围凝胶的带入.