如何向PCDNA3.1 载体上加入FLAG标签?

如何向PCDNA3.1 载体上加入FLAG标签? 使用pcDNA3.1载体转化大肠杆菌后,如何进行筛选?如题：追加20-30分使用pcDNA3.1载体转化大肠杆菌后,如何进行筛选（筛选转化后的大肠杆菌）? 本人实验,现在手上有pCDNA3.1-EGFP载体,现在想在载体上插入目的基因PTEN片段,应该怎么做? 载体是pcdna3.1,感受态可以用哪种?有没有特别的限制? pcdna3.1作为载体的重组质粒转入大肠杆菌怎么检测筛选酶切了hindⅢ和EcoRⅠ, 质粒转染细胞不表达的问题~想研究某跨膜蛋白,构建真核表达质粒（构建了多种,载体有PCDNA3.1-FLAG,PCDNA3,1-V5,PCMV-5'端MYC,PCDNA3-5'FLAG,PCDNA3-5'HA）,转染始终不表达,细胞换过293T,AD293,COS1,COS7等,转染操 pcDNA3.1和pcDNA3 有什么区别么? cos-7细胞是真核还是原核细胞?如果要转染入这个细胞的话,构建的质粒必须是pcDNA这个载体吗?另外请问这个 pcDNA3.1 /CT-GFP-TOPO是什么意思?如何翻译?如果要转染进COS-7细胞的话如何选择表达载体 用pcDNA3.1(+)作为表达载体,设计PCR引物时怎么能保正不移码?起始密码子前的碱基个数应该是多少? pcDNA3.1的多克隆酶切位点有哪些 细胞膜上载体蛋白如何运动 如何载体-引物-PCR电泳,如何加入载体,引物,一起扩增再测序?想知道试验方法?多谢了 在遗传学上,克隆载体、表达载体、克隆宿主、表达宿主如何准确定义?克隆载体：表达载体：克隆宿主：表达宿主： 细胞膜上载体的数量如何影响协助扩散 简述 如何将外源DNA连接到载体上 如何根据电泳图确定载体和目的片段的加入量 滴定管加入液体如何向滴定管中加入液体? 我构建了一个基因的真核表达载体,转染293T细胞后以空质粒PCDNA3.1及未转染质粒的孔为对照,还有一个以PBS代替一抗的未转染质粒的孔为对照,结果只有PBS代替一抗的孔未被染色,其余孔都被染色