作业帮【求助】细胞胞浆蛋白就是总蛋白吗?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/03 20:49:49
【求助】细胞胞浆蛋白就是总蛋白吗?
【求助】细胞胞浆蛋白就是总蛋白吗?
【求助】细胞胞浆蛋白就是总蛋白吗?
谁能提供提取细胞总蛋白的方法吗?还是说膜蛋白和胞浆蛋白分开提取出来后再混合?加细胞裂解液处理得到的可溶性蛋白就认为是细胞总蛋白.不需要分别提取再混合thh_hn wrote:我预提取细胞株总蛋白,查阅相关资料显示有胞浆蛋白和膜蛋白的提取方法,请问哪位大侠能告诉我,胞浆蛋白就是总蛋白吗?或者胞浆蛋白和膜蛋白才统称为总蛋白?
总蛋白包括胞浆蛋白、胞膜蛋白和胞核蛋白.以下是有关细胞总蛋白的提取以及裂解液的配制的操作方法,希望能够对你有用.
细胞总蛋白的提取.pdf (110.27k)非常感谢!总蛋白提取最简单的方法就是裂解液直接裂解细胞（或加入超声）裂解液配方呢?谁能提供?我查到的好象是分开提的配方thh_hn wrote:我预提取细胞株总蛋白,查阅相关资料显示有胞浆蛋白和膜蛋白的提取方法,请问哪位大侠能告诉我,胞浆蛋白就是总蛋白吗?或者胞浆蛋白和膜蛋白才统称为总蛋白?
胞浆是指Cytosol,严格的讲,是指细胞质（cytoplasm）除去细胞器的部分,因此不仅不包括核与细胞膜,而且不包括线粒体、内质网等细胞器
不过这是针对细胞学说的,对于生化研究习惯上把细胞质除去核的部分叫做胞浆,公司卖的Cytosol protein kit也是只把细胞核去掉而已
胞浆蛋白显然不是总蛋白
如果你是做蛋白质组研究或纯化未知蛋白的话,最好把不同区域的蛋白分别提取
如果只是做western看看特定蛋白,直接把整个细胞裂解上样即可,这时其实是“whole extraction” 或“whole lysate” ,除了总蛋白,还有其他非蛋白的杂质
最简单的办法是把细胞放在SDS-PAGE电泳缓冲液里煮沸,上样
不过不是适合所有细胞一般的手册上都有很多这类配方