请问,荧光定量PCR的两个曲线感觉都是正常的,怎么跑SDS-page胶却出现双带呢?而荧光曲线不正常跑胶却正常我用Trizol和氯仿手提人血清miRNA先反转,然后做Realtime PCR..然后跑2%的DNA胶.目的DNA长度大

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/04 14:15:09
请问,荧光定量PCR的两个曲线感觉都是正常的,怎么跑SDS-page胶却出现双带呢?而荧光曲线不正常跑胶却正常我用Trizol和氯仿手提人血清miRNA先反转,然后做Realtime PCR..然后跑2%的DNA胶.目的DNA长度大

请问,荧光定量PCR的两个曲线感觉都是正常的,怎么跑SDS-page胶却出现双带呢?而荧光曲线不正常跑胶却正常我用Trizol和氯仿手提人血清miRNA先反转,然后做Realtime PCR..然后跑2%的DNA胶.目的DNA长度大
请问,荧光定量PCR的两个曲线感觉都是正常的,怎么跑SDS-page胶却出现双带呢?而荧光曲线不正常跑胶却正常
我用Trizol和氯仿手提人血清miRNA先反转,然后做Realtime PCR..然后跑2%的DNA胶.目的DNA长度大概是20~50bp.有什么可能的原因吗?





请问,荧光定量PCR的两个曲线感觉都是正常的,怎么跑SDS-page胶却出现双带呢?而荧光曲线不正常跑胶却正常我用Trizol和氯仿手提人血清miRNA先反转,然后做Realtime PCR..然后跑2%的DNA胶.目的DNA长度大
一楼没有做过 miRNA,先不要理他.
楼主的做法我并没有做过,因为我使用的是Tagman试剂盒带有特异性探针,所以并无特异性问题.
我理解楼主的意思是：
1505及1489曲线不正常,1505条带正常,1489条带不正常
659与1491曲线正常,但是两个条带都不正常
我的意见如下：
1.楼主的引物是自己设计的吗?目标只有二十多碱基,哪里来的特异性?
2.楼主的反转用的什么引物?
3.楼主的样本是否含有DNA?有检查过DNA消化干净了吗?

1505那个明显是非特异扩增了，另外目的片段20-50bp这样的话基本上是引物二聚体了，建议设计稍微长点儿的

请问,荧光定量PCR的两个曲线感觉都是正常的,怎么跑SDS-page胶却出现双带呢?而荧光曲线不正常跑胶却正常我用Trizol和氯仿手提人血清miRNA先反转,然后做Realtime PCR..然后跑2%的DNA胶.目的DNA长度大 怎么理解荧光定量pcr的溶解曲线 实时荧光定量PCR结果中溶解曲线的 荧光定量PCR溶解曲线问题 荧光定量PCR和实时荧光定量PCR的区别? 请问：实时荧光定量PCR怎样设定才能有溶解曲线?做实时荧光定量PCR用的是ABI7300型荧光定量PCR仪,实验结果中溶解曲线一栏没有任何曲线,请问是什么原因?是我没有设定溶解曲线的选项吗,要怎 请问末端标记的荧光PCR是定量PCR吗?什么又是实时PCR、实时定量PCR呢? 请问目前的 一步法荧光定量反转录PCR试剂盒 荧光定量PCR绝对定量时的标准曲线优劣的判断指标有哪些呢? 请问做实时荧光定量PCR实验时,为什么做标准曲线? realtime ）就是想做个梯度稀释的cDNA的标准曲线,请问我应该怎么做,我用的是Roche的荧光定量PCR仪,请问我是选相对定量还是绝对定量做曲线啊? northern blot 和荧光定量PCR区别我想研究非编码RNA,文献中好多都做northern blot,请问northern blot 和荧光定量PCR的区别?两者都是从转录水平检测RNA的表达啊, 荧光定量PCR 标准曲线的制作 是不是可以软件自动生成的! 乙肝病毒(HBV-DNA)定量 实时荧光定量PCR 9.12E+06 请问严重的程度? 谁能具体解释一下荧光定量PCR中溶解曲线的意思以及作用? 怎么判断实时荧光定量PCR标准曲线是否准确 StepOnePlus实时荧光定量PCR仪怎么设置融解曲线 荧光定量PCR扩增曲线基线过高什么原因